柱層析硅膠時(shí)裝柱的的注意事項(xiàng)
裝柱子的技巧
柱層析硅膠的裝柱非常重要，裝柱的效果會(huì)直接影響層析分離效果。有濕法裝柱和干法裝柱等兩種方法。濕法裝柱很簡單，使用也最普遍，就是先用比固定相多一倍的洗脫劑將固定相活成勻漿，柱子底部先用脫脂棉塞緊，然后倒入洗脫劑將脫脂棉中氣泡趕出。歡迎關(guān)注化學(xué)科訊。用漏斗將活好的固定相倒入柱子中，打開底部活塞，將柱子中高出固定相的溶劑放出。期間不斷用橡皮棒敲打，將固定相敲實(shí)，做到密實(shí)均勻無氣泡即可。很多時(shí)候用加壓的方法可以很高效地裝好柱子，而且在柱子中沒有氣泡產(chǎn)生。干法裝柱與濕法裝柱剛好相反的是，它是將干燥的吸附劑從柱子上端直接加入到一個(gè)空的柱子中，然后用油泵抽柱子底部，相當(dāng)于減壓過柱，直到柱子變得很結(jié)實(shí)，再用淋洗劑“走柱子”。干法裝柱的一個(gè)缺點(diǎn)就是在裝入洗脫劑后，由于溶劑和固定相之間的吸附放熱，所以柱子容易變花，影響分離效果。
解決的方法是：(1)固定相一定要添加結(jié)實(shí)；(2)一定要用較多的溶劑“走柱子”。直到柱子的下端不再發(fā)燙，恢復(fù)到室溫后再撤去壓力。無論使用哪種方法裝柱，最后都要求所裝的柱子結(jié)實(shí)、勻稱、無氣泡。
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