色譜分離技術(shù)又稱層析分離技術(shù)或色層分離技術(shù)，是一種分離復(fù)雜混合物中各個(gè)組分的有效方法。它是利用不同物質(zhì)在由固定相和流動(dòng)相構(gòu)成的體系中具有不同的分配系數(shù)，當(dāng)兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，這些物質(zhì)隨流動(dòng)相一起運(yùn)動(dòng)，并在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配，從而使各物質(zhì)達(dá)到分離。

      色譜有多種，按固定相類型和分離原理可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、親和色譜、大孔吸附樹脂、凝膠色譜、聚焦色譜等。常用的是吸附色譜分離技術(shù)。

     吸附色譜法是指混合物隨流動(dòng)相通過吸附劑（固定相）時(shí)，由于吸附劑對(duì)不同物質(zhì)具有不同的吸附力而使混合物中各組分分離的方法。此法特別適用于脂溶性成分的分離。被分離的物質(zhì)與吸附劑、洗脫劑共同構(gòu)成吸附層析的三要素，彼此緊密相連。

      常用的極性吸附劑有：硅膠、氧化鋁。硅膠顯弱酸性，適于分離酸性和中性化合物，分離生物堿時(shí)需在流動(dòng)相中加入適量的有機(jī)堿；氧化鋁呈堿性，適于分離生物堿等堿性成分，不宜用于分離有機(jī)酸等酸性成分。極性吸附劑的吸附作用有以下特點(diǎn)。 

     1．被分離物質(zhì)極性越強(qiáng)，吸附力越強(qiáng)。強(qiáng)極性溶質(zhì)將優(yōu)先被吸附。

     2．溶劑極性越弱，則吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附能力越強(qiáng)。隨溶劑極性的增強(qiáng)，則吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附力將減弱。

     3．當(dāng)加入極性較強(qiáng)的溶劑后，先前被硅膠或氧化鋁所吸附的溶質(zhì)可被置換而洗脫出來。

     活性炭是常用的非極性吸附劑。活性炭對(duì)非極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和力，在水中對(duì)溶質(zhì)表現(xiàn)出強(qiáng)的吸附能力。從活性炭上洗脫被吸附的物質(zhì)時(shí)，溶劑的極性越小，洗脫能力越強(qiáng)。

     一般化合物的極性按下列官能團(tuán)的順序增強(qiáng)：

        —CH2—CH2—，—CH＝＝CH—，—OCH3，—COOR，＞C＝＝O，—CHO，—NH2，—OH，—COOH。

    溶劑的極性可大體根據(jù)介電常數(shù)的大小來判斷。介電常數(shù)越大，則極性越大。一般溶劑的介電常數(shù)按以下順序增大：環(huán)已烷（1.88），苯（2.29），無水乙醚（4.47），氯仿（5.20），乙酸乙酯（6.11），乙醇（26.0），甲醇（31.2），水（81.0）。

     吸附色譜的操作方式主要有薄層色譜法和柱色譜法。薄層色譜法是將吸附劑均勻鋪在玻璃上，點(diǎn)樣，然后用合適的展開劑展開而達(dá)到分離、鑒定和定量的目的。柱色譜是將待分離的樣品均勻加入到裝有固定劑填料的柱子內(nèi)，再以適當(dāng)?shù)南疵搫┫疵撘赃_(dá)到不同成分的分離。 

    色譜分離技術(shù)常用于功能性的分離精制。例如，柱層層析硅膠廠家從茶葉中提取茶多酚時(shí)可采用層析法分離除去咖啡因及其他不純物；從橘皮的超臨界萃取液中分離提取類胡蘿卜素；從芝麻粕提取液中分離提取木聚糖；從蔗糖的酶處理液中分離精制低聚果糖；從牛初乳中分離提取乳鐵蛋白；從磷蝦酶解殘?jiān)樘嵋褐蟹蛛x提取蝦黃素、卵磷脂等。