柱層析硅膠的操作技巧都有哪些？

勻漿法：

1、秤重：200-300目硅膠，稱30-70倍于上樣量；倘若不容易分，還能夠用100倍量的硅膠H。干硅膠的視密度在0.4左右，因而要稱40g硅膠，使用量杯量100ml還能夠。

2、拌和成勻漿：加上干硅膠容量一倍的有機(jī)溶液用玻璃棒充裕攪拌。倘若過(guò)柱劑是醫(yī)用乙醚/甲基叔丁基醚/二甲苯體系管理，就用醫(yī)用乙醚拌；倘若過(guò)柱劑是醫(yī)用乙醚/醇體系管理，就用醫(yī)用乙醚拌。倘若不能拌和成勻漿，說(shuō)明有機(jī)溶液中水份成分非常大，尤其是甲基叔丁基醚/二甲苯，倘若不與水配搭走分配色譜分析儀的話，盡量提早用無(wú)水硫酸鈉久置干燥。醫(yī)用乙醚用無(wú)水氯化鈣干燥，以除去1%的醇。倘若樣品對(duì)酸較為比較敏感，不能用醫(yī)用乙醚體系管理過(guò)柱。

3、裝柱：將柱底用棉花塞緊，不必用海沙，加上約1/3容量醫(yī)用乙醚（醫(yī)用乙醚），裝上蓄液球，打開(kāi)柱下液壓缸，將勻漿一次落到蓄液球內(nèi)。隨著著路基地基沉降，會(huì)發(fā)生一些硅膠沾在蓄液球內(nèi)，用醫(yī)用乙醚（醫(yī)用乙醚）將其沖入柱中。

4、壓實(shí)：路基地基沉降開(kāi)展后，加上很多的醫(yī)用乙醚，用雙連球或打氣泵沖裝，直至流動(dòng)性速率平穩(wěn)。柱床約被削減至9/10容量。無(wú)論走當(dāng)然壓柱或沖裝柱，都應(yīng)進(jìn)行這一步，可使分離度提高 很多，且還能夠避免過(guò)柱時(shí)由于柱床委縮導(dǎo)致開(kāi)裂。

5、上樣：干試濕試都可以。海沙是沒(méi)必要的。上樣后，加上一些過(guò)柱劑，再將一團(tuán)棉球塞至接近硅膠表面。接著就可以放心地加上許多過(guò)柱劑，而不易毀壞硅膠表面。

6、過(guò)柱和收集：柱層析實(shí)際上是在擴(kuò)散和提取正中間的考量。太低的過(guò)柱抗拉強(qiáng)度并不大好，推薦用方向?qū)?shù)過(guò)柱。收集的例子：10mg上樣量，1g硅膠H，0.5ml收一減壓渣油；1-2g上樣量，50g硅膠（200-300目），20-50ml收一減壓渣油。

7、檢測(cè)：要很多地運(yùn)用專用噴顯劑，倘若僅用紫外線消毒燈，會(huì)耗損較多產(chǎn)品，紫外光的敏感性一般比噴顯劑底1-2個(gè)數(shù)量級(jí)。

8、送譜：收集的產(chǎn)品旋干，在送譜前一般務(wù)必 重結(jié)晶。倘若樣品太少或是是為液體，可過(guò)一小凝膠柱，作為送譜前的純化方法?？沙渥V1.5ppm左右簡(jiǎn)言之的“硅膠”峰。

干試上樣，一般用于固體或粘度大的液體樣品。樣品用低溶點(diǎn)可溶解有機(jī)溶液溶化，加上1-3倍的粗硅膠，晾干或旋干，干燥的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)是硅膠成細(xì)粉而不粘在瓶?jī)?nèi)腔。安上的柱頂上留一段有機(jī)溶液，把吸咐了樣品的硅膠慢慢地到進(jìn)去，震動(dòng)柱頂或再加上一些有機(jī)溶液，把粘在柱內(nèi)腔的硅膠洗下。

在裝柱頂?shù)那樾蜗?，不論是濕試或者干試裝，用節(jié)橡皮管邊裝邊敲打，那般可以把柱頂裝的比較勻，僅有柱頂裝得勻，提取預(yù)期效果可以好。