一、立柱安裝

操作要點：安裝塔前，塔底應(yīng)墊一層吸水棉，防止吸附劑泄漏

有兩種方法加載柱干法和濕法。

（1） 干柱裝填：薄層層析硅膠通過漏斗裝入柱內(nèi)，中間不間斷，慢慢形成細流在管子里。也可以用橡膠電纜輕敲硅膠柱，使硅膠填充連續(xù)、均勻、致密。柱填料

之后，打開下端活塞，倒入洗脫液，將柱內(nèi)空氣排出，保持一定的液位。

（2） 濕柱裝載：將準(zhǔn)備好使用的洗脫液裝載到柱中，打開下活塞進行洗脫探員慢慢地流了出去。然后將硅膠緩慢且連續(xù)地倒入柱中（或?qū)⒐枘z與適當(dāng)?shù)南疵撘夯旌?/span>制備的懸浮液緩慢地加入柱中的小硅膠中，并在重力和洗脫液的驅(qū)動下在柱中自由沉降。在此期間，流出的洗脫液應(yīng)連續(xù)添加回柱中，以保持一定的液位，直到硅膠完全添加并放入柱中。內(nèi)部結(jié)算不會改變。然后在硅膠上加一小塊濾紙或一點吸水棉。根據(jù)樣品在控制洗脫液液位到一定高度。

均質(zhì)：攪拌成勻漿。加入兩倍于干硅膠體積的溶劑，用玻璃棒充分攪拌。如果洗脫液為石油醚-乙酸乙酯/丙酮體系，則將其與石油醚混合；如果洗脫液為氯仿/酒精系統(tǒng)，與氯仿混合。如果不能攪拌成勻漿，則溶劑中的水太大，特別是乙酸乙酯/丙酮，若與水不相容，須事先用無水硫酸鈉除去分配色譜晾干。氯仿用無水氯化鈣干燥以除去1%的酒精。如果樣品對酸敏感，則不能使用。

二、裝載樣品

將待分離樣品溶于紹里柱裝樣時所用的洗脫液中，制備體積小、濃度高的樣品。將溶液加入色譜柱中的硅膠表面。如果樣品不溶于柱載用的洗脫液，則溶解樣品在揮發(fā)性溶劑中，加入硫柳汞（不多過柱中硅膠總量的1/10），并與之充分混合。除去溶劑后，將與樣品混合的硅膠均勻地添加到柱的頂部（始終保持洗脫液在恒定水平）用另一層硅膠覆蓋以裝載樣品。注意沿柱內(nèi)壁緩慢加入，吊裝后硅膠上端面應(yīng)保持平整。上面樣品中的硅1/60~1/30膠水。

三、洗脫

用薄層色譜法可以選擇洗脫劑，當(dāng)ILC形成時，Rf值為0.20.3。以試劑體系為洗脫體系，采用梯度洗脫法進行洗脫。首先，打開柱下端的活塞，保持洗脫液流速為每秒12滴。上端連續(xù)加入洗脫液（可如果單一溶劑的洗脫效果不好，可以混合溶劑洗滌（一般不過三種溶劑）通常采用梯度洗脫。洗脫液洗脫能力逐漸由弱變強。

四、收集和處理

洗提液按等份收集，每次收集使用的薄層層析硅膠量大致相等。每種洗脫液都很薄層質(zhì)檢查，結(jié)合含有相同成分的洗脫液。經(jīng)過濃縮和再結(jié)晶，通?？梢缘玫?/span>單體成分。如果仍然是幾個單體組分的混合物，則單體組分的結(jié)晶不易分離出來。你需要進一步的色譜分析或用其他方法分離。