層析硅膠應(yīng)注意的操作問題有哪些
層析硅膠應(yīng)注意的操作問題有哪些,下面讓我們一起來學(xué)習(xí)一下吧!
1、裝柱:
柱頭下邊的活塞桿一定不必涂潤(rùn)滑液,會(huì)被滲濾劑送到商品中的,能夠選用四氟節(jié)門的。干式和濕式裝柱感覺沒有什么差別,只需可以把柱頭裝實(shí)就可以了。裝好的柱頭應(yīng)當(dāng)要適當(dāng)?shù)木o密(太密了滲濾劑走的很慢),一定要?jiǎng)蚍Q(要不然試品便會(huì)從一側(cè)斜著出來)。書里寫的全是不可以看到汽泡,我認(rèn)為在絕大多數(shù)狀況下有一些氣泡沒很大的危害,一充壓汽泡就全出來了。自然假如你裝的柱頭一直有小氣泡就表明需要多訓(xùn)練了。可是柱頭更避諱的是裂開,不管豎的或是橫的,都是會(huì)危害分離出來實(shí)際效果,乃至廢止!
2、加樣:
用少許的有機(jī)溶劑溶試品加樣,加滿后將下邊的活塞桿開啟,待有機(jī)溶劑層降低至石英沙面時(shí),再加少許的低極性溶劑,隨后再開啟活塞桿,這般兩三次,一般石英沙就基本上是灰白色的了。添加滲濾劑,一開始不必充壓,等溶試品的有機(jī)溶劑和試品層有一段距離(2~4cm就可以了),再充壓,那樣規(guī)避了有機(jī)溶劑(如二氯甲烷等)帶入試品迅速下滑。
3、滲濾劑的挑選:
覺得上應(yīng)使所需點(diǎn)在rf0.2~0.3上下的比較好。不必覺得在板往上爬高了分的非常開,過柱頭就用那類旋光性,假如rf在0.6,即便相距0.2也很難在柱頭上分離,由于柱頭是一個(gè)數(shù)次爬板的情況,能夠根據(jù)公式計(jì)算的較為:0.6/0.8一次的分離度,毫無疑問比不上(0.2/0.3)的三次方或四次方大
4、試品的搜集:
用硅橡膠作固定不動(dòng)相過柱子的基本原理是一個(gè)吸咐與解析的均衡。因此假如試品與硅橡膠的吸咐比較強(qiáng)得話,就不易排出。那樣便會(huì)產(chǎn)生,后邊的點(diǎn)先出,而之前的點(diǎn)完出。這時(shí)候能夠 選用三氧化二鋁作固定不動(dòng)相。此外,搜集的試管嬰兒尺寸要以試品量而定,尤其是少量試品,假如用大試管嬰兒,很有可能一根就收到了三個(gè)試品,wuwu。假如都用小試管嬰兒那勞動(dòng)量又很大。
5、解決方法:
柱分后的商品,因?yàn)椴捎昧舜笈康挠袡C(jī)溶劑,在其中的雜物也會(huì)累積商品中,因此要是想送剖析,用小量的有機(jī)溶劑清洗一下,由于絕大多數(shù)的殘?jiān)侨茉谟袡C(jī)溶劑里的,一洗基本上就沒了,需要時(shí)開展重結(jié)晶。
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