柱層析硅膠廠家?guī)鷾\析其產(chǎn)品運(yùn)用技巧有哪些
柱層析硅膠廠家小編帶您了解其相關(guān)知識(shí):硅膠層析法的別離原理是依據(jù)物質(zhì)在硅膠上的吸附力不同而得到別離,一般情況下較大的物質(zhì)易被硅膠吸附,較弱的物質(zhì)不易被硅膠吸附,整個(gè)層析進(jìn)程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸進(jìn)程。依據(jù)填充基質(zhì)和樣品分配交流原理不同,離子交流層析,凝膠過濾層析和親和層析是三種別離混合物的經(jīng)典層析技能。
在運(yùn)用柱層析硅膠時(shí)的幾個(gè)技巧:
1、硅膠的運(yùn)用
初做柱層析很容易把柱子裝得長了或短了,有時(shí)還會(huì)有很多的硅膠剩余,糟蹋硅膠,這主要是對硅膠等固定相的運(yùn)用的量沒有掌握。柱層析用的硅膠一般是100-200目,100毫升硅膠的質(zhì)量在47克左右,假如裝一個(gè)直徑是2.8厘米的柱子,能夠裝18厘米高。
2、洗脫劑的運(yùn)用
洗脫劑的可用薄層層析來確定,一般以待別離樣品Rf值為0.2-0.3為宜。選擇的洗脫劑應(yīng)該使兩相鄰物質(zhì)Rf值之差大化。不要認(rèn)為在板上爬得高別離的效果就比較好,假如Rf在0.6,即使相差0.2也不容易在柱子上分開,柱層析硅膠廠家認(rèn)為因?yàn)橹邮且粋€(gè)屢次爬板的進(jìn)程,能夠通過公式的比較:0.6/0.8一次的別離度,肯定不如(0.2/0.3)的三次方或四次方大。
常用的展開劑性小的用乙酸乙酯:石油醚體系;性較大的用甲醇:氯仿體系;性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸體系;拖尾能夠加入少量氨水或冰醋酸。對于很難別離的化合物,一是增加柱子的長度和直徑,二是減小洗脫劑的性,這樣能夠很好地將混合物分開。
3、柱層析硅膠裝柱子的技巧
柱層析的裝柱非常重要,裝柱的效果會(huì)直接影響層析別離效果。有濕法裝柱和干法裝柱等兩種辦法。濕法裝柱很簡單,運(yùn)用也普遍,就是先用比固定相多一倍的洗脫劑將固定相活成勻漿,柱子底部先用脫脂棉塞緊,然后倒入洗脫劑將脫脂棉中氣泡趕出。
處理的辦法是:(1)固定相一定要增加健壯;(2)一定要用較多的溶劑“走柱子”。
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