柱層析硅膠廠家為您介紹薄層層析硅膠的層析方法
簿層層析:薄層層析是一種簡便、快速、微量的層析方法。一般將柱層析用的吸附劑撒布到平面如玻璃片上,形成一薄層進行層析時一即稱薄層層析。其原理與柱層析基本相似。下面柱層析硅膠廠家為您介紹薄層層析硅膠的層析方法有哪些。
1.薄層層析的特點:薄層層析在應用與操作方面的特點與柱層析的比較。
2.吸附劑的選擇:薄層層析用的吸附劑與其選擇原則和柱層析相同。主要區(qū)別在于薄層層析要求吸附劑(支持劑)的粒度更細,一般應小于250目,并要求粒度均勻。用于薄層層析的吸附劑或預制薄層一般活度不宜過高,以Ⅱ~Ⅲ級為宜。而展開距離則隨薄層的粒度粗細而定,薄層粒度越細,展開距離相應縮短,一般不超過10厘米,否則可引起色譜擴散影響分離效果。
3.展開劑的選擇:薄層層析,當吸附劑活度為一定值時(如Ⅱ或Ⅲ級),對多組分的樣品能否獲得滿意的分離,決定于展開劑的選擇。中草藥化學成分在脂溶性成分中,大致可按其極性不同而分為無極性、弱極性、中極性與強極性。但在實際工作中,經(jīng)常需要利用溶劑的極性大小,對展開劑的極性予以調整。
4. 特殊薄層:針對某些性質特殊的化合物的分離與檢出,有時需采用一些特殊薄層。
?、?熒光薄層:有些化合物本身無色,在紫外燈下也不顯熒光,又無適當?shù)娘@色劑時,則可在吸附劑中加入熒光物質制成熒光薄層進行層析。展層后置于紫外光下照射,薄層板本身顯熒光,而樣品斑點處不顯熒光,即可檢出樣品的層析位置。常用的熒光物質多為無機物。其一是在 254nm紫外光激發(fā)下顯出熒光的,如錳激潔的硅酸鋅。另一種為在365nm紫外光激發(fā)下發(fā)出熒光的,如銀激化的硫化鋅硫化鎬。
?、?絡合薄層:常用的有硝酸銀薄層,用來分離碳原子數(shù)相等而其中C一C雙鍵數(shù)目不等的一系列化合物,如不飽和醇、酸等。其主要機理是由于C一C鍵能與硝酸銀形成絡合物,而飽和的C一C鍵則不與硝酸銀絡合。因此在硝酸銀薄層上,化臺物可由于飽和程度不同而獲得分離。層析時飽和化合物由于吸附弱而Rf強,含一個雙鍵的較含兩個雙鍵的Rf值高,含一個三鍵的較含一個雙鍵的Rf值高。此外,在一個雙鍵化臺物中,順式的與硝酸銀絡合較反式的易于進行。因此,還可用來分離順反異構體。
?、?酸堿薄層和PH緩沖薄層:為了改變吸附劑原來的酸堿性,可在鋪制薄層時采用稀酸或稀堿以代替水調制薄層。例如硅膠帶微酸性,有時對堿性物質如生物堿的分離不好,如不能展層或拖尾,則可在鋪薄層時,用稀堿溶液0.1~0.5NNa0H溶液制成堿性硅膠薄層。例如豬屎豆堿在以硅膠為吸附劑時,以氯仿-丙酮一甲醇(8:2:1)為展開劑Rf<0.1,采用堿性硅膠薄層用上述相同展開劑,Rf值增至0.4左右。說明豬屎豆堿為--堿性生物堿。
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